1.色素鑒定可將細菌接種于KingA、B斜面培養基，37℃24h或置室溫觀察5天。　　(1)綠膿色素：在KingA斜面上呈深綠色，液體培養基接觸空氣處綠色明顯。若色素不明顯或混雜其他色素，可加氯仿于斜面，置室溫觀察1～24h，如仍不明顯，可在氯仿液中滴加稀鹽酸，綠膿色素在酸液層呈紅色。　　(2)綠膿熒光色素：銅綠假單胞菌、熒光假單胞菌、惡臭假單胞菌在KingB斜面培養基上呈現黃綠色熒光。　　(3)紅膿色素：在KingA斜面培養基上呈紅紫色，如置37℃24h紅色不明顯，可再置室溫3～5天觀察。銅綠假單胞菌產生紅膿毒素者較少見。　　(4)黑膿毒素：銅綠假單胞菌在含蛋白胨培養基中生長時常有黑膿毒素產生。嗜麥芽窄食單胞菌也有黑膿毒素產生。　　2.其他鑒定綠膿桿菌和其他假單胞菌的主要鑒別是葡萄糖氧化分解、氧化酶、精氨酸雙水解、乙酰胺酶、葡萄糖酸氧化、硝酸鹽還原產氨試驗均為陽性。綠膿桿菌敗血癥患者尿中出現銅綠色蛋白尿，將患者尿液調成酸性、堿性和中性，置于暗室分別用紫外線照射，如有銅綠蛋白尿則發生淡綠色熒光。

標本采集采自不同感染部位的各種標本，包括血液、尿液、痰標本、膿汁、穿刺液等。還包括來自醫院環境中的各種標本如水、空氣、物體表面采樣等。染色鏡檢為革蘭陰性菌，菌體大小（1.5～5.0)um×寬(0.5～1)um，細長且長短不一，有時呈球桿狀或線狀，成對或短鏈狀排列。菌體的一端有單鞭毛，無芽胞。分離培養本菌生長對營養要求不高。對有正常菌群存在的臨床標本或采自環境中的標本應接種選擇性培養基如麥康凱瓊脂培養基（MAC）；對無正常菌群存在的臨床標本如血液、腦脊液、穿刺液等可接種普通或血瓊脂培養基。在普通瓊脂培養基上生長18~24h可以見到扁平、濕潤的菌落，該菌所產生的帶熒光的水溶性青膿素與綠膿素相結合將使得培養基呈亮綠色；在血瓊脂平板上生長時可以見到在菌落的周圍有溶血環，菌落呈金屬光澤；如果是在液體培養基中則呈渾濁狀生長，在液體表面形成菌落，而在培養基底部細菌的