一般來說，診斷骨髓炎可行CT檢查以確定病變骨及顯示椎旁膿腫的形成，放射骨掃描在病變早期即有反映，但無法區別感染、骨折和腫瘤，通過椎間盤間隙或感染骨的穿刺活檢和手術活檢。本病患者常出現局限性骨痛，發熱和不適則提示骨髓炎可能。血白細胞計數可以正常。但ESR和C-反應蛋白增高。X線變化在感染后3～4周出現。可見骨破壞，軟組織腫脹，軟骨下骨板侵襲。

鑒別診斷：
　　1.對于血源性骨髓炎，臨床上主要分為三種類型　
　(1)急性血源性骨髓炎 其特點是具全身性癥狀，發病10天內X線檢查無改變，大多數病例沒有既往發作的病史。
　　(2)亞急性血源性骨髓炎 其特點是不具全身中毒癥狀，發病時已出現X線改變，病程超過10天，沒有既往發作的病史。
　　(3)慢性血源性骨髓炎 其特點是依據病情變化全身癥狀可有可無，X線改變常見，有既往感染發作的病史。
　　2.急性骨髓炎需鑒別的疾病　　從全身來看，應于急性風濕熱、急性白血病鑒別，從局部及X線所見，應與骨肉瘤、Ewing肉瘤、骨組織細胞增多癥鑒別：
　　(1)骨肉瘤 通常好發于10～20歲，在四肢骨，大部分發生在長骨干骨骺部;偶爾發生在骨干部，和骨髓炎相比，其骨破壞、骨膜反應的范圍比較局限，但有時X線鑒別困難;通過CT、MRI檢查及活體組織檢查鑒別是必要的。
　　(2)Ewing肉瘤 常常與骨髓炎難以鑒別。Ewing肉瘤發病部位在四肢骨的骨干部;有時有劇痛，伴發熱及局部熱感;血沉升高;白細胞升高;CRP陽性，呈炎癥反應。X線上，早期以骨膜反應為主，骨髓內缺乏變化，診斷困難。骨膜反應與骨髓炎相比，規則，多半呈蔥皮狀骨膜反應，這是特征。必須活檢證實診斷。
　　(3)骨組織細胞增多癥 根據發病部位，顯示種種X線像。發生在四肢長管狀骨時，有高度的骨質破壞及顯著的骨膜反應，因局部及全身均有輕度的炎癥癥狀，骨組織細胞增多癥與骨髓炎相比，骨破壞的范圍及骨膜反應都是局限性的;如從死骨上看，有時也不出現硬化像。
　　(4)骨樣骨瘤 有時與骨髓炎難以鑒別。
X線上，常發生在長管狀骨的偏在性(即發生在中央偏上，或下)X線顯示高度骨膜反應及骨皮質肥厚，如果細心觀察，其中可見病灶的骨透亮像。