衣原體單克隆抗體膠體金法測定沙眼衣原體

　　【摘要】 　　目的：介紹一種沙眼衣原體的快速檢測方法。

　　方法：采用衣原體單克隆抗體膠體金法進行實驗室診斷及鑒別診斷沙眼及其它結角膜病。

　　結果：陰性結果，僅檢測板的質控區(C)有1條紅線，檢測區(T)無紅線出現;陽性結果，除質控區(C)外，另有1條紅線出現在檢測區(T)。10例臨床診斷沙眼的患者，其檢測結果陽性率為100%。10例其他原因引起的慢性結膜炎患者，其中1例查到沙眼衣原體。10例慢性病毒性結膜炎患者中1例查到沙眼衣原體。

　　結論：該方法簡便快速，僅0.5h可出結果，結果判斷直觀，不需要熒光顯微鏡、酶聯檢測儀等設備。具有廣闊的推廣應用前景。

　　關鍵詞：沙眼;沙眼衣原體;衣原體單克隆抗體膠體金法;慢性結膜炎

　　【關鍵詞】 沙眼 沙眼衣原體 衣原體單克隆抗體膠體金法 慢性結膜炎

　　0引言

　　沙眼是由沙眼衣原體引起的一種慢性傳染性結膜角膜炎，可致盲。因其在瞼結膜表面形成粗糙不平的外觀，形似沙粒，故名�？砂l生于任何人群，主要見于衛生狀況差的地區[1]。全世界約有3～6億人口患沙眼。20世紀50年代以前，該病曾在我國廣泛流行。70年代后，發病率大大降低�，F在，重癥沙眼已很少見，臨床上常見的是一些處于一期或以前的不典型病例，單憑臨床表現，只能初步診斷為疑似沙眼。另外有些結膜炎患者的癥狀和輕型沙眼的癥狀十分相像，如不及時確診，勢必延誤治療。既往實驗室采用雞胚細胞培養法分離衣原體，雖然特異性強，但成本昂貴，費時費力，且受多種因素影響，難以推廣應用。70年代初建立的微量免疫熒光法，相對簡便快速，但因應用多價抗體，不易標準化。衣原體單克隆抗體的問世，有效的克服了上述兩種方法的缺點，采用熒光、酶、膠體金等標記衣原體單克隆抗體，用于實驗診斷，具有快速、簡便、特異性強、檢出率高等優點。本文利用衣原體單克隆抗體膠體金法診斷和鑒別診斷30例眼病患者，現將結果報告如下。

　　1對象和方法

　　1.1對象 選取的30例患者均系西安市眼科醫院門診或住院病房。其中男16例，女14例，年齡 7～70歲。膠體金衣原體單克隆抗體診斷盒：購自上海凱創生物技術有限公司。

　　1.2方法 用5g/L地卡因麻醉，使用試劑盒提供的配套拭子于結膜上穹隆部反復擦拭以保證取到大量細胞。將樣品處理管放在工作臺上，加入6滴溶液A，將采樣拭子放入含有溶液A的樣品處理管中，室溫放置，在處理過程中不斷旋轉并在管壁擠壓拭子，使液體不斷被擠出，重復多次，處理2min。然后加入6滴溶液B，旋轉并擠壓拭子，盡量使液體流出，處理2min。將樣品處理管中已處理的樣品滴加2～3滴至檢測試劑盒的加樣孔中，等待結果的出現，加樣10min時可判讀結果，為確保陰性結果，請勿在15min后判斷結果。最后按感染物品的處理方法將拭子丟棄.處理后的樣品如在60min內使用，并不影響試劑盒的檢測結果。

　　陰性結果，僅質控區(C)有一條紅線，檢測區(T)無紅線出現(圖1)。陽性結果，除質控區(C)外，另有一條紅線出現在檢測區(T)(圖1)。無效結果， 質控區(C)不出現紅線,則結果無效。應更換新的檢測試劑盒重復實驗�？捎檬Ｓ嗟囊烟幚淼臉悠坊蛑匦氯�樣。

　　圖1 沙眼衣原體(略)

　　A：陰性;B：陽性

　　2結果

　　臨床明確診斷沙眼的患者10例，其檢測結果陽性率為100%。10例其他原因引起的慢性結膜炎患者，其中1例查到沙眼衣原體。10例慢性病毒性結膜炎患者中1例查到沙眼衣原體。

　　3討論

　　衣原體是介于立克次氏體和病毒之間的一種原核微生物，呈球形，直徑約0.3～0.5μm，有細胞壁。能致沙眼的病原體就目前所知有多種血清型。我國目前沙眼發病率大為降低，但診斷卻愈來愈困難，主要原因是輕型沙眼的癥狀和其他類型的結膜炎臨床難以區分，如不及時診治，將會出現倒睫、角膜血管翳、內翻倒睫等引起角膜損害，影響視力甚至可致盲。膠體金檢測法簡便快速，比直接免疫熒光法[2,3]更省時，僅0.5h就可出結果，結果判斷直觀，不需要熒光顯微鏡、酶聯檢測儀等設備。具有廣闊的推廣應用前景。試劑盒采用的是抗衣原體屬特異性脂多糖LPS單克隆抗體，因此，不但可用于眼科，更重要的是可用于婦產科、泌尿科、性病科等沙眼衣原體感染性疾病的診斷。

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（責任編輯：林嘉豪 ）