血紅蛋白測定法主要有氰化高鐵血紅蛋白測定法、疊氮高鐵血紅蛋白測定法、堿羥血紅蛋白測定法、酸化血紅蛋白測定法和十二烷基硫酸鈉血紅蛋白測定法等。 1.氰化高鐵血紅蛋白測定法：在一定量的血液中加入試劑，使血紅蛋白轉化為氰化高鐵血紅蛋白，然后用分光光度計在特定波長下測定吸光度，計算血紅蛋白濃度。 2.疊氮高鐵血紅蛋白測定法：原理與氰化高鐵血紅蛋白測定法相似，但使用的試劑不同。 3.堿羥血紅蛋白測定法：通過堿液使血紅蛋白轉化為堿羥血紅蛋白，進行吸光度測定。 4.酸化血紅蛋白測定法：利用酸性溶液處理血液，再測定吸光度。 5.十二烷基硫酸鈉血紅蛋白測定法：使用十二烷基硫酸鈉使血紅蛋白變性，然后測定。 不同的血紅蛋白測定法各有特點，在實際應用中，需根據(jù)具體情況選擇合適的方法，并嚴格按照操作規(guī)范進行，以確保測定結果的準確性。

(1)升高：溶血性貧血(60～650mg/L)、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(200～2500mg/L)、陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿癥、陣發(fā)性行軍性血紅蛋白尿癥、黑尿熱、冷凝集素病、燒傷、溶血性輸血反應(>150mg/L)、體外循環(huán)手術后、溫性抗體型自身免疫性溶血性貧血、鐮狀細胞性貧血、地中海貧血等。　　(2)遺傳性球形紅細胞性貧血的游離血紅蛋白濃度正常。

1、氰化高鐵血紅蛋白法（HiCN）：1966年被ICSH推薦為參考方法。該法操作簡單、顯色快、結果穩(wěn)定可靠、讀取吸光度后可直接定值等優(yōu)點。其致命的弱點是氰化鉀（KCN）試劑有劇毒，使用管理不當可造成公害。2、十二烷基硫酸鈉血紅蛋白測定法（SDS）：該法操作簡單、呈色穩(wěn)定、準確性和精確性符合要求、無公害等優(yōu)點。但由于摩爾消光系數(shù)尚未最后確認，不能直接用吸光度計算Hb濃度，而且SDS試劑本身質量差異較大會影響檢測結果。3、疊氮高鐵血紅蛋白（HiN3）法：該法優(yōu)點與HiCN測定法相似、最大吸收峰在542nm、顯色快、結果穩(wěn)定、試劑毒性僅為HiCN測定法的1/7，但仍存在公害問題。4、堿羥血紅蛋白（AHD575）測定法：該法試劑簡單、呈色穩(wěn)定、無公害、吸收峰在575nm、可用氯化血紅素作為標準品。但儀器多采用540nm左右濾光板，限制了此法使用。5、溴代十六烷基三甲胺（CTAB）血紅蛋白測定法：該法試劑溶血性強又不破壞白細胞，適用于儀器上自動檢測Hb和白細胞。缺點是測定結果的準確度和精密度不佳。

　類過氧化物酶反應法：<40mg/L(<4mg/dl)。血漿游離血紅蛋白增高可表明存在血管內溶血,如陣發(fā)性寒冷性瓜紅蛋白尿,冷凝集素綜合征,行軍性血紅蛋白尿,微血管病性溶血性貧血,溶血性輸血反應,體外循環(huán)等.地中海性貧血時也可升高.